Mycobacterium tuberculosis
| Mycobacterium tuberculosis | |
|---|---|
| Klasifikace | |
| Rod: | Mycobacterium |
| Základní údaje | |
| Morfologie: | acidorezistentní tyčka |
| Vztah ke kyslíku: | striktní aerob |
| Vztah k buňkám: | intracelulární parazit |
| Faktory virulence: | netvoří toxiny, přežívá v makrofázích zábranou fúze fagosomu s lyzosomem |
| Onemocnění: | tuberkulóza |
| Zdroj: | člověk |
| Přenos: | nejčastěji inhalační |
| Terapie: | antituberkulotika v kombinaci |
| Prevence: | BCG vakcinace |
Mycobacterium tuberculosis (též Bacil Kochův – BK) je středně dlouhá, někdy granulovaná acidorezistentní tyčka. Patří mezi obligátně patogenní mykobakteria a je původcem tuberkulózy. Je blízké Mycobacterium bovis.
Obsah |
upravit Charakteristika
Mykobakteria jsou striktně aerobní.
Vysoká hydrofobie bakterie znesnadňuje zpracování lysosomálními enzymy makrofágů (viz dále).
Mají dlouhou generační dobu (20–30 hodin, srov. Mycobacterium leprae). Proto je pro jejich záchyt nutná dlouhá kultivace na tzv. šikmých půdách. Ta může trvat 6 - 10 týdnů.
- jsou to intracelulární parazité, způsobují chronické infekce
- netvoří toxiny
upravit Acidorezistence
Acidorezistence je špatná barvitelnost organickými barvivy, odolnost k odbarvení kyselinami, zásadami a alkoholem. Souvisí s vysokým obsahem lipidů ve stěně (typický znak mykobakterií). Jejich základem jsou mykolové kyseliny – nejdelší mastné kyseliny v přírodě (C60–C90, podobné, ale kratší mají ještě nokardie a korynebakteria).
upravit Antigeny
upravit Tuberkulin
Starý (Tuberculinum vetus) byl poprvé připraven Kochem. Získán byl zahuštěním tekuté půdy po oddělení bakteriální masy. Neměl léčebné účinky.
- PPD
Purified Protein Derivative (PDD), čištěný tuberkulin. Dodnes využíván pro Mantoux test (Charles Mantoux – francouzský lékař) tedy jišťování buněčné hypersenzitivity opožděného typu proti tuberkulinu:
- intradermální aplikace (aby se neodplavil)
- po 24–48 hodinách se vytvoří v případě pozitivního výsledku (u infikovaných a vakcinovaných) zánětlivý infiltrát (pupenec), tvořený T-lymfocyty a makrofágy.
- měří se indurace (nikoliv erytém) – pozitivní > 5 mm
upravit Cord-faktor (dimykolát trehalózy)
- toxický glykolipid, součást buněčné stěny
- je to faktor virulence
- alteruje mitochondriální membránu → inhibice respirace a fosforylace
upravit Další antigeny
- arabinogalaktan
- peptidoglykan
- komplexní glykolipidy
upravit Průkaz
upravit Přímý průkaz
Prokazujeme přímo Mycobacterium tuberculosis, nebo její součásti, následujícími metodami:
- přímá mikroskopie = základní metoda; vysoká specificita, nízká senzitivita
- barvení podle Ziehla-Neelsena
- karbolfuchsin za tepla
- odbarvení kyselinou (mykobakteria zůstanou obarvená)
- dobarvení ostatních struktur metylenovou modří nebo malachitovou zelení
- vyšetření 100 zorných polí
- barvení podle Ziehla-Neelsena
- fluorescenční barvení
- auramin za tepla
- odbarvení kyselinou
- dobarvení fuchsinem
- vyšetření pod UV – stačí menší zvětšení (25–50 zorných polí)
- Kultivační průkaz;
Má, oproti mikroskopii, vyšší senzitivitu na záchyt. U TBC zlatý standard.
- dekontaminace vzorku (likvidace rychleji rostoucích mikrobů 4% NaOH)
- centrifugace (→ zahuštění)
- očkování na Löwenstein-Jensenovu půdu (vaječná) / tekutou půdu – Šulova
- odečet výsledku za 3, 6 a 9 týdnů
- zrychlená kultivace v systémech odvozených od hemokultur (indikátorem je CO2); výsledek za 5 dní
- Molekulární genetika
Výsledek za 24–48 hodin. Používá se PCR, ale pozitivní jsou i neviabilní bakterie (průkaz DNA mrtvých), tj. nelze udělat diagnózu opřenou pouze o PCR (např. pokud není vyjádřená klinika)!
upravit Nepřímý průkaz
Pro nepřímý průkaz je k dispozici metoda QuantiFERON®:
- do tří zkumavek se dá pacientova krev
- třepáním se spláchne antigen ze stěny zkumavky
- test není pozitivní u očkovaných
Existuje i riziko falešné negativity u imunodeficientních jedinců! Schéma testu je následující:
- zkumavka je prázdná (negativní kontrola)
- zkumavka obsahuje aktivátor T-lymfocytů (pozitivní kontrola) – aktivní T-lymfocyty produkují IFN-γ, který se kvantifikuje a udává pozitivitu reakce
- zkumavka obsahuje specifické peptidy z bakterie
upravit Onemocnění
Podrobnější informace naleznete na stránce tuberkulóza. upravit Prevence
Proti vzniku infekce Mycobacterium tuberculosis chrání vakcinace BCG (atenuovaný kmen Mycobacterium bovis):
- vyvolá v místě aplikace vznik arteficiálního primárního komplexu
- po 2–4 týdnech se rozvíjí uzlíkovitý granulom, který se vyhojí za 6–8 týdnů
- u již očkovaných nebo infikovaných dochází k urychlené reakci, a to již za 24–48 hodin → může u nich vzniknout nekróza (tzv. Kochův fenomén)
- účinnost vakcinace je 40–80 %.
- dříve se provádělo aktivní vyhledávání infekce RTG snímkováním hrudníku, avšak tato metoda je dnes již obsoletní
upravit Léčba
Léčba tuberkulózy trvá dlouho (měsíce). Aby se předešlo riziku vzniku resistence, používají se kombinace antituberculotik. V případě monoterapie hrozí rozvoj tzv. fall & rise phenomenon tj. selekce rezistentních mutantů, které nastartují další vlnu infece.
- Proporční test
K vyšetření citlivosti k antibiotikům se používá proporční test:
- bakterie se vyočkují na půdu bez antibiotika a na půdu s kritickou koncentrací antibiotika
- pokud na půdě s antibiotikem vyroste 0–1 % kolonií v poměru k půdě bez antibiotika, je kmen citlivý
K léčbě tuberkulózy se používají antituberkulotika:
- isoniazid – batericidní, vysoce účinný – inhibuje mykobakteria na 5–6 dní po jedné dávce
- rifampicin – baktericidní, blokuje RNA polymerázu, barví tělesné tekutiny do oranžova („pocení krve“)
- pyrazinamid – baktericidní, aktivní při kyselejším pH (vhodná vlastnost pro intracelulární prostředí); s rifampicinem usmrcuje i polospící mykobakteria
- streptomycin – baktericidní aminoglykosid (vazba na 30S podjednotku ribozomu), ototoxický
- etambutol – bakteriostatický, inhibuje syntézu některých metabolitů
upravit Odkazy
upravit Související články
upravit Externí odkazy
upravit Použitá literatura
- BEDNÁŘ, M, et al. Lékařská mikrobiologie. 1. vydání. Marvil, s. r. o., 1996. s. 305–313. ISBN 80-238-0297-6.
