Měření růstu bakterií
Z WikiSkript
Růst populace bakterií je způsoben mnohočetným binárním dělením, které se opakuje. Rozmnožování podléhá určitým vlivům prostředí a jeho průběh můžeme demonstrovat na růstové křivce.
Růstová křivka[upravit | editovat zdroj]
Můžeme rozlišit 4 fáze:
- Klidová fáze (lag fáze) – bakterie se adaptují na nové prostředí, počet buněk se nezvyšuje. Buňky, které se nepřizpůsobily na nové prostředí, odumírají. Zvyšuje se objem a hmotnost buňky. Roste citlivost vůči fyzikálním a chemických vlivům. Zvyšuje se množství enzymů, syntetizují se složky nutné pro dělení.
- Zrychlený růst - buňky se přizpůsobily, začínají se dělit, růstová rychlost se zvyšuje, generační doba zkracuje.
- Exponenciální fáze (log fáze/logaritmická fáze) – je nejdůležitější, bakterie se intenzivně množí, rychlost růstu je největší a generační doba nejkratší a populace exponenciálně roste, fáze trvá do vyčerpání živin. Buňky mají konstantní velikost, produktů metabolismu přibývá. Rychlost růstu je ovlivněna obsahem limitující živiny.
- Fáze zpomaleného růstu - rychlost růstu se zpomaluje, počet odumírajících buněk narůstá, vyčerpávají se živiny.
- Stacionární fáze – zpomaluje se rychlost množení buněk, vzniká stav rovnováhy, kdy se počet buněk zhruba nemění, dochází k akumulaci metabolitů a je vyčerpáno živné médium.
- Fáze odumírání – počet odumřelých buněk je větší než počet nově vzniklých, může docházet ke tvorbě klidových stádií.Celkový počet buněk může klesat (autolýza/samotrávení)
Postup[upravit | editovat zdroj]
- Z bujónu obsahující bakterie odebereme pomocí automatické pipety 0,1 ml, naočkujeme na Endovu půdu a rovnoměrně rozetřeme vypálenou kličkou.
- Tento postup opakujeme pětkrát, vždy po dvaceti minutách – tento časový odstup je zvolen proto, že přibližná generační doba E. coli je právě dvacet minut.
- Necháme inkubovat přes noc, následně spočítáme narostlé kolonie v jednotlivých Petriho miskách a sestavíme růstovou křivku.
