Mycobacterium tuberculosis

Z WikiSkript
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacteriaceae
Mycobacterium
Kolonie Mycobacterium tuberculosis.
Kolonie Mycobacterium tuberculosis.
Morfologie acidorezistentní tyčinka
Vztah ke kyslíku striktně aerobní
Kultivace Löwenstein-Jensenova půda, Šulova půda
Antigeny cord-faktor, arabinogalaktan, peptidoglykan, komplexní glykolipidy
Faktory virulence netvoří toxiny, přežívá v makrofázích zábranou fúze fagosomu s lyzosomem
Zdroj nemocný člověk
Přenos nejčastěji inhalační
Výskyt celosvětový
Inkubační doba kožní reakce po 3–8 týdnech od nákazy [1]
Onemocnění tuberkulóza
Terapie antituberkulotika v kombinaci
Očkování BCG vakcinace
MeSH ID D009169


Mycobacterium tuberculosis (též Bacil KochůvBK) je středně dlouhá, někdy granulovaná acidorezistentní tyčinka. Patří mezi obligátně patogenní mykobakteria a je původcem tuberkulózy. Je blízké Mycobacterium bovis.

Charakteristika[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Mykobakteria jsou striktně aerobní.

Vysoká hydrofobie bakterie znesnadňuje zpracování lysosomálními enzymy makrofágů (viz dále).

Mají dlouhou generační dobu (20–30 hodin, srov. Mycobacterium leprae). Proto je pro jejich záchyt nutná dlouhá kultivace na tzv. šikmých půdách. Ta může trvat 6–10 týdnů.

  • Jsou to intracelulární paraziti, způsobují chronické infekce,
  • netvoří toxiny.

Acidorezistence[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Acidorezistence je špatná barvitelnost organickými barvivy, odolnost k odbarvení kyselinami, zásadami a alkoholem. Souvisí s vysokým obsahem lipidů ve stěně (typický znak mykobakterií). Jejich základem jsou mykolové kyseliny – nejdelší mastné kyseliny v přírodě (C60–C90, podobné, ale kratší mají ještě nokardie a korynebakteria).

Antigeny[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Barvení dle Ziehla-Neelsena.
Mycobacterium tuberculosis.

Tuberkulin[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Starý (Tuberculinum vetus) byl poprvé připraven Kochem. Získán byl zahuštěním tekuté půdy po oddělení bakteriální masy. Neměl léčebné účinky.

PPD

Purified Protein Derivative (PPD), čištěný tuberkulin. Dodnes využíván pro Mantoux test (Charles Mantoux – francouzský lékař) tedy zjišťování buněčné hypersenzitivity opožděného typu proti tuberkulinu:

  1. intradermální aplikace (aby se neodplavil)
  2. po 24–48 hodinách se vytvoří v případě pozitivního výsledku (u infikovaných a vakcinovaných) zánětlivý infiltrát (pupenec), tvořený T-lymfocyty a makrofágy
  3. měří se indurace (nikoliv erytém) – pozitivní > 5 mm

Cord-faktor (dimykolát trehalózy)[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

  • toxický glykolipid, součást buněčné stěny
  • je to faktor virulence
  • alteruje mitochondriální membránu → inhibice respirace a fosforylace

Další antigeny[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Průkaz[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Přímý průkaz[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Prokazujeme přímo Mycobacterium tuberculosis, nebo její součásti, následujícími metodami:

  • přímá mikroskopie = základní metoda; vysoká specificita, nízká senzitivita
    • barvení podle Ziehla-Neelsena
      1. karbolfuchsin za tepla
      2. odbarvení kyselinou (mykobakteria zůstanou obarvená)
      3. dobarvení ostatních struktur metylenovou modří nebo malachitovou zelení
      4. vyšetření 100 zorných polí
  • fluorescenční barvení
    1. auramin za tepla
    2. odbarvení kyselinou
    3. dobarvení fuchsinem
    4. vyšetření pod UV – stačí menší zvětšení (25–50 zorných polí)
Kultivační průkaz

Má, oproti mikroskopii, vyšší senzitivitu na záchyt. U TBC zlatý standard.

  1. dekontaminace vzorku (likvidace rychleji rostoucích mikrobů 4% NaOH)
  2. centrifugace (→ zahuštění)
  3. očkování na Löwenstein-Jensenovu půdu (vaječná) / tekutou půdu – Šulova
  4. odečet výsledku za 3, 6 a 9 týdnů
  • zrychlená kultivace v systémech odvozených od hemokultur (indikátorem je CO2); výsledek za 5 dní
Molekulární genetika

Výsledek za 24–48 hodin. Používá se PCR, ale pozitivní jsou i neviabilní bakterie (průkaz DNA mrtvých), tj. nelze udělat diagnózu opřenou pouze o PCR (např. pokud není vyjádřená klinika)!

Nepřímý průkaz[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Pro nepřímý průkaz je k dispozici metoda QuantiFERON®:

  • do tří zkumavek se dá pacientova krev
  • třepáním se spláchne antigen ze stěny zkumavky
  • test není pozitivní u očkovaných

Existuje i riziko falešné negativity u imunodeficientních jedinců! Schéma testu je následující:

  1. zkumavka je prázdná (negativní kontrola)
  2. zkumavka obsahuje aktivátor T-lymfocytů (pozitivní kontrola) – aktivní T-lymfocyty produkují IFN-γ, který se kvantifikuje a udává pozitivitu reakce
  3. zkumavka obsahuje specifické peptidy z bakterie

Onemocnění[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Searchtool right.svg Podrobnější informace naleznete na stránce tuberkulóza.


Prevence[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Proti vzniku infekce Mycobacterium tuberculosis chrání vakcinace BCG (atenuovaný kmen Mycobacterium bovis):

  • vyvolá v místě aplikace vznik arteficiálního primárního komplexu
  • po 2–4 týdnech se rozvíjí uzlíkovitý granulom, který se vyhojí za 6–8 týdnů
  • u již očkovaných nebo infikovaných dochází k urychlené reakci, a to již za 24–48 hodin → může u nich vzniknout nekróza (tzv. Kochův fenomén)
  • účinnost vakcinace je 40–80 %
  • dříve se provádělo aktivní vyhledávání infekce RTG snímkováním hrudníku, avšak tato metoda je dnes již obsoletní

Léčba[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Léčba tuberkulózy trvá dlouho (měsíce). Aby se předešlo riziku vzniku resistence, používají se kombinace antituberkulotik. V případě monoterapie hrozí rozvoj tzv. fall & rise phenomenon, tj. selekce rezistentních mutantů, které nastartují další vlnu infekce.

Proporční test

K vyšetření citlivosti k antibiotikům se používá proporční test:

  • bakterie se vyočkují na půdu bez antibiotika a na půdu s kritickou koncentrací antibiotika
  • pokud na půdě s antibiotikem vyroste 0–1 % kolonií v poměru k půdě bez antibiotika, je kmen citlivý

K léčbě tuberkulózy se používají antituberkulotika:

  • isoniazid – baktericidní, vysoce účinný – inhibuje mykobakteria na 5–6 dní po jedné dávce
  • rifampicin – baktericidní, blokuje RNA polymerázu, barví tělesné tekutiny do oranžova („pocení krve“)
  • pyrazinamid – baktericidní, aktivní při kyselejším pH (vhodná vlastnost pro intracelulární prostředí); s rifampicinem usmrcuje i polospící mykobakteria
  • streptomycin – baktericidní aminoglykosid (vazba na 30S podjednotku ribozomu), ototoxický
  • etambutol – bakteriostatický, inhibuje syntézu některých metabolitů


Odkazy[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Související články[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Externí odkazy[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

Reference[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

  1. BENEŠ, Jiří. Infekční lékařství. 1. vydání. Praha : Galén, c2009. s. 277-284. ISBN 978-80-7262-644-1.

Použitá literatura[✎ upravit | ☲ editovat zdroj]

  • BEDNÁŘ, M, et al. Lékařská mikrobiologie. 1. vydání. Marvil, s. r. o., 1996. s. 305–313. ISBN 80-238-0297-6.