Spectral Karyotyping

Spektrální karyotypizace (SKY) je molekulárně cytogenetická metoda, která při jedné hybridizaci označí všechny páry lidských chromozomů.

Metodika značení

Metoda Spectral Karyotyping (SKY) je obdobou metody M-FISH. Metoda SKY využívá k značení chromozomů směs rozdílně značených malovacích sond. Každá sonda podle své komplementarity hybridizuje s jiným chromozomem. Na základě toho můžeme rozlišit všech 24 lidských chromozomů. Odlišnost jednotlivých sond dosahujeme použití různých fluorochromů a jejich kombinací. Například sonda na 1. chromozomu je značena fluorochromem A, sonda na 2. chromozomu je značena fluorochromem B, sonda na 3. chromozomu je značena kombinací fluorochromů A+B.

  • celkový počet kombinací k je dán vzorcem: k = 2n-1 kde n je počet použitých barviv.

Dosadíme-li za n = 5, zjistíme, že pomocí 5 fluorochromů dostaneme dostatek kombinací k označení všech 24 lidských chromozomů.

Sky spectral karyotype

Vyhodnocování signálů

Ke snímání jednotlivých signálů se využívá fluorescenční mikroskop vybavený Sagnacovým interferometrem. Obraz vytvořený interferometrem je pak sejmut kamerou, převeden do počítače a speciální software pak rozliší všechny barevné odstíny chromozomů.


Odkazy

Související články

Externí odkazy

Použitá literatura

  • KOČÁREK, Eduard, Martin PÁNEK a Drahuše NOVOTNÁ. Klinická cytogenetika 1. 2., upravené vydání vydání. Praha : Karolinum, 2010. 134 s. ISBN 978-80-246-1880-7.